Question

科研人員為探究誘導酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體的適宜條件，進行了如下實驗．
①提取蠶豆葉綠體：過濾蠶豆新鮮葉片研磨液，對濾液進行【A】后獲得葉綠體，加入2mL 0.35mol?L^-1氯化鈉溶液，制成懸浮液．
②制備酵母原生質體：在適宜條件下用2%的蝸牛酶處理酵母菌，獲得酵母原生質體．
③誘導酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體：將酵母原生質體與蠶豆葉綠體混和后，在不同溫度和pH下用【B】（化學試劑）處理60min后洗滌．用顯微鏡觀察，結果如下表：

實驗組別	溫度	pH	酵母原生質體數(shù)/mL	含葉綠體的酵母原生質體數(shù)/mL
1	30℃	7.6	760	4
2	37℃	7.6	1 100	7
3	37℃	6.0	1 250	5
4	37℃	10.2	990	3

請回答：
（1）補全實驗步驟：A

 

；B

 

．
（2）步驟①中加入0.35mol?L^-1氯化鈉的作用是

 

．
（3）步驟②中蝸牛酶的作用是除去酵母細胞的

 

．
（4）實驗結果表明酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體較適宜條件是

 

．在適宜溫度下，酵母原生質體容易攝入葉綠體與細胞膜的

 

增強有關．

Answer 1

考點：細胞融合的方法,細胞膜的結構特點

專題：

分析：（1）由于酵母原生質體失去了細胞壁的保護而容易吸水脹破，因此，需要選擇等滲溶液（0.35mol/L NaCl溶液）保存原生質體，以保持原生質體的正常形態(tài)和活性．（2）當酵母原生質體成功攝取葉綠體后，可以在光學顯微鏡下觀察到原生質體中有綠色顆粒（葉綠體）．（3）葉綠體是光合作用的場所，若葉綠體能在酵母原生質體中正常代謝，則該酵母原生質體就可能會由原先的異養(yǎng)轉變?yōu)樽责B(yǎng)，最終培育的酵母細胞就可因能自養(yǎng)而獨立生活．

解答： 解：（1）新鮮葉片研磨液，對濾液進行離心后獲得葉綠體；將酵母原生質體與蠶豆葉綠體混和后，聚乙二醇（PEG）處理，原生質體與葉綠體融合．
（2）步驟①蠶豆葉綠體加入0.35mol?L^-1氯化鈉，作用是維持葉綠體的正常形態(tài)．
（3）步驟②蝸牛酶處理酵母菌，獲得酵母原生質體，則蝸牛酶的作用是除去酵母細胞的細胞壁．
（4）表格分析，酵母原生質體攝取蠶豆葉綠體較適宜條件是溫度為37℃，pH為7.6；酵母原生質體容易攝入葉綠體體現(xiàn)膜的流動性．
故答案為：
（1）（差速）離心　聚乙二醇（PEG）
（2）維持葉綠體的正常形態(tài)（防止葉綠體吸水漲破）
（3）細胞壁
（4）溫度為37℃，pH為7.6    　流動性

點評：本題以“酵母原生質體攝取葉綠體的條件研究”為背景，考查原生質體及葉綠體的制備方法、誘導生物膜融合的方法及原理，以及相關實驗分析能力