Question

【題目】人類利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術使各種微生物經(jīng)過發(fā)酵作用制作各種食品，在這些操作過程中請 你通過相關微生物的形態(tài)、結構以及生長繁殖的環(huán)境條件等特點回答以下問題：

（1）果酒的制作是利用酵母菌在______________的溫度條件且______________條件下產(chǎn)生酒精；利用醋酸菌制作果醋的過程中則有兩條途徑得以實現(xiàn)：一個是____________________________，另一個是____________________________。

（2）為了更好地研究這些微生物的生命特征，研究人員往往要先配制適宜的培養(yǎng)基，通常用______________對菌種進行擴繁，用______________來觀察菌落特征以辨別菌種。

（3）將分別盛有9毫升水的6支試管滅菌，并按101-105編號，按下圖中操作對乳酸菌進 行系列稀釋，則6號試管中菌液濃度為4號的______________，若在5號試管中取樣，在平板中涂布 出的菌落平均數(shù)為218，則原液中菌落濃度為______________個/毫升。

（4）在統(tǒng)計菌落數(shù)目的過程中甲乙兩組同學分別用______________測定同一樣品中的菌落數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中得到了不同的結果，甲組同學在第一個48小時內(nèi)涂了一個平板，統(tǒng)計菌落數(shù)為215，為了增強可信度該同學又在第二個48小時內(nèi)的了第二個平板， 統(tǒng)計菌落數(shù)為232，在第三個48小時內(nèi)涂了第三個平板，統(tǒng)計菌落數(shù)為288；乙組同學則只用了一個48小時，同時涂了3個平板，統(tǒng)計面落數(shù)分別為21、212和256，兩組同學都以這三個統(tǒng)計結果的平均數(shù)作為實驗最終數(shù)據(jù)：甲組為247，乙組為163。你認為_____的結果更接近真實值，你認為這兩組的實驗需要改進嗎?_____；改進方法是_______________________。

Answer 1

【答案】18-25℃ 缺氧和酸性 在氧氣和糖源都充足時葡萄汁中的糖分解為醋酸 當缺少糖源時將乙醇變?yōu)橐胰�，進而形成醋酸 液體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基 1% 218╳105 稀釋涂布平板法 甲組 需要 甲組應該同時涂三個平板，乙組應該舍掉21那一組，重新取樣再做一組

【解析】

1、在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2、醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。

3、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）酵母菌產(chǎn)酒的最適溫度為18-25℃, 且缺氧呈酸性的條件下產(chǎn)生酒精；而醋酸桿菌產(chǎn)生果醋時在有糖和無糖的時候都可以完成，所以有兩條途徑，一個為在氧氣和糖源都充足時葡萄汁中的糖分解為醋酸，另一個為當缺少糖源時將乙醇變?yōu)橐胰�，進而形成醋酸。

（2）液體培養(yǎng)基可以使微生物和菌液充分接觸，提高微生物的生長速率，所以可以用液體培養(yǎng)基對菌種擴繁；而菌落的形成是在固體培養(yǎng)基上，所以用固體培養(yǎng)基觀察菌落特征。

（3）系列稀釋的操作是涂布計數(shù)之前的重要步驟，同時也涉及這之后對菌液濃度的估算，如本題圖所示，菌液每稀釋一次，濃度就減少到原來的1/10，所以6號是4號濃度的1/100，5號則是原液稀釋5次之后的濃度，所以原液濃度應為218╳105個/mL

（4）測定活菌的數(shù)目通常使用稀釋涂布平板法；微生物計數(shù)時應該選取30-300菌落數(shù)的平板，甲組統(tǒng)計了3次并求平均值，更接近真實值；微生物菌種是活菌，隨著時間變化細菌濃度會改變，所以操作不應該分時間前后，因此甲組也不合理，應該同時涂三個平板，而乙組計數(shù)時有21菌落數(shù)出現(xiàn)，應該舍掉21那一組，為了增加信度應重新取樣再做一組。