Question

【題目】某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如圖甲所示:圖乙是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題: .

(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過__________次免疫后 才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是__________小鼠，理由是______。

(2)圖乙中的過程②誘導(dǎo)融合運(yùn)用的原理是___________， 該過程中區(qū)別于植物原生質(zhì)體融合的方法是用___________處理。

(3)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_____,(只考慮細(xì)胞兩兩融合)。融合后需要用特定的__________培養(yǎng)基師選，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，該細(xì)胞的特點(diǎn)是___________。

(4)經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)得到雜交瘤細(xì)胞后，一般采用體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)通入適量CO2的目的是_____。

(5) 未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是__________。

Answer 1

【答案】四 Y Y的血清抗體效價(jià)最高 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 滅活的病毒 B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 選擇 既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體 維持培養(yǎng)液的pH （已免疫的）B淋巴細(xì)胞已高度分化（或不能無限增殖）

【解析】

試題本題結(jié)合圖解，考查體液免疫及單克隆抗體的制備過程。分析柱形圖：用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)，由圖可知，隨著免疫次數(shù)的增加，血清抗體效價(jià)逐漸升高。在第四次免疫過程中出現(xiàn)了Y血清抗體均達(dá)到16000以上；在第五次中，Y的效價(jià)最大，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞；B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞形成的雜交細(xì)胞有三種：B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞。

（1）由圖可知，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上，因此小鼠最少需要經(jīng)過四次免疫后 才能有符合要求的。小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生血清抗體效價(jià)最高，最適用于制備B淋巴細(xì)胞。
（2）圖乙中的過程②為小鼠B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，制備單克隆抗體用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)，運(yùn)用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。該過程中區(qū)別于植物原生質(zhì)體融合的方法是用滅活的病毒處理。
（3）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞。融合后需要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)，這種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。
（4）動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件：無菌、無毒的環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH、氣體環(huán)境。通入適量CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH。
(5)（已免疫的）B淋巴細(xì)胞已高度分化（或不能無限增殖），未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活。