Question

【題目】為培育矮稈性狀的水稻，科研人員進(jìn)行了下列研究。

（1）科研人員構(gòu)建含T－DNA的重組質(zhì)粒，在T－DNA區(qū)段中含有已知序列的潮霉素抗性基因。將水稻W(wǎng)的愈傷組織浸入含有上述重組質(zhì)粒的__________菌液中，20 min后轉(zhuǎn)入水稻愈傷組織培養(yǎng)基培養(yǎng)，3天后轉(zhuǎn)入含__________的培養(yǎng)基中篩選抗性愈傷組織。誘導(dǎo)愈傷組織的材料取自水稻W(wǎng)的未成熟胚，其原因是____________________。

（2）提取轉(zhuǎn)基因水稻W(wǎng)葉片細(xì)胞的總DNA，利用T－DNA區(qū)段中的__________序列設(shè)計(jì)引物，用PCR法對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻進(jìn)行____________________。

（3）將抗性愈傷組織__________形成的水稻幼苗移栽至大田，得到T0代轉(zhuǎn)基因水稻。以__________為對(duì)照，對(duì)T0代水稻進(jìn)行表型分析，篩選得到矮稈突變體G。判斷G的矮稈突變性狀是否為可遺傳變異的常用方法是觀察G的自交后代（T1代）____________________。

Answer 1

【答案】 農(nóng)桿菌 潮霉素 分化程度較低，易于脫分化 潮霉素抗性基因 分子（水平）鑒定 再分化 （非轉(zhuǎn)基因）水稻W(wǎng) 是否出現(xiàn)矮稈性狀（或是否發(fā)生性狀分離）

【解析】試題分析：本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)，通過識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，在結(jié)合題意作答。

（1）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。在T-DNA區(qū)段中含有已知序列的潮霉素抗性基因，因此用含潮霉素的培養(yǎng)基中篩選抗性愈傷組織。誘導(dǎo)愈傷組織的材料取自水稻W的未成熟胚，其原因是未成熟胚的分化程度較低，易于脫分化。

（2）在T-DNA區(qū)段中含有已知序列的潮霉素抗性基因，因此提取轉(zhuǎn)基因水稻W葉片細(xì)胞的總DNA后，利用T-DNA區(qū)段中的潮霉素抗性基因序列設(shè)計(jì)引物，再用PCR法對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻進(jìn)行分子（水平）鑒定。
（3）愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成幼苗。以（非轉(zhuǎn)基因）水稻W為對(duì)照，對(duì)T0代水稻進(jìn)行表型分析，篩選得到矮稈突變體G。判斷G的矮稈突變性狀是否為可遺傳變異的常用方法是觀察G的自交后代（T1代）是否發(fā)生性狀分離。