Question

【題目】某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設計實驗步驟如下，請給予合理的補充。

（1）采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1 g，置于經過_________法滅菌處理的_________（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中，28 ℃振蕩培養(yǎng)。

（2）接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進行___ ___處理。之后，將菌液涂布接種于以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 ℃條件下培養(yǎng)。為避免污染，需將培養(yǎng)皿呈_________狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實驗可信度，本步驟需設計___________作為空白對照。

（3）篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍，如果菌落周圍的現象是__________，則說明此種菌能夠___________。從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株，采用___________法接種于新的培養(yǎng)基平板，可對菌株進行進一步的純化。

Answer 1

【答案】（1）高壓蒸汽滅菌 液體

（2）系列稀釋（或梯度稀釋） 淀粉 倒置 未接種的空白培養(yǎng)基（或“接種等量無菌水的培養(yǎng)基”）

（3）出現透明圈 分泌淀粉酶 平板劃線

【解析】（1）培養(yǎng)基一般都用高壓蒸汽滅菌法滅菌，因為后面要進行涂布，所以應該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)。

（2）減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用梯度稀釋的方法。由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，所以培養(yǎng)基就應只以淀粉為唯一碳源。倒置可以減少培養(yǎng)基受污染，為排除其他因素影響，需要設置未接種的空白的培養(yǎng)基作對照組。

（3）淀粉被水解，培養(yǎng)基會出現透明圈的現象，明此種菌能夠分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解。用平板劃線法來培養(yǎng)，可進一步純化菌種。