Question

【題目】從自然菌樣篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定。

（1）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)分解纖維素的細(xì)菌樣應(yīng)從____________環(huán)境采集。

（2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)，使其在群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)纖維素分解菌的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇_______________的培養(yǎng)基，此外，在篩選纖維素的分解菌的過(guò)程中則是用____________染色法，培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的_________。

（3）對(duì)分離的菌種還要做進(jìn)一步的鑒定，如在鑒定分解尿素的細(xì)菌時(shí)，需在培養(yǎng)基中加入________指示劑，若指示劑變________色，說(shuō)明有目的菌株存在。

（4）從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，如需計(jì)數(shù)，在對(duì)樣品懸液進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，未經(jīng)振蕩而直接取上層懸液進(jìn)行梯度稀釋，用不同稀釋倍數(shù)的樣液接種到平板上進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比正確操作統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)______（填偏大、偏小或相等）。

（5）在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在____________條件下進(jìn)行，通常將____________的形狀、大小、顏色等特征作為鑒定菌種的依據(jù)。

（6）制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在 ________附近倒平板。等待平板冷卻凝固后，將平板________。

（7）DNA的鑒定中，DNA與________試劑混合經(jīng)水浴加熱呈________色。

Answer 1

【答案】富含纖維素 以纖維素為唯一碳源 剛果紅 透明圈 酚紅 紅 偏大 無(wú)菌 菌落 酒精燈火焰 倒置 二苯胺 藍(lán)色

【解析】

篩選目的菌株一般是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法。培養(yǎng)基在配制時(shí)，各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行pH調(diào)整，接種前要進(jìn)行滅菌，保證無(wú)菌操作，培養(yǎng)微生物時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置。

（1）因?yàn)椴煌�的微生物生存的環(huán)境不同，所以采集纖維素分解菌應(yīng)從富含纖維素的環(huán)境中采集。

（2）篩選微生物需配制選擇培養(yǎng)基，因?yàn)槔w維素分解菌能分解纖維素，故在培養(yǎng)基中加入纖維素為唯一碳源。在篩選纖維素分解菌時(shí)往往采用剛果紅染色法，因?yàn)閯偣�紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法合成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。

（3）尿素分解菌能夠產(chǎn)生脲酶使尿素分解為氨而使染液pH升高，使得酚紅指示劑顯紅色，所以可以用酚紅指示劑鑒定尿素分解菌，證明目的菌株的存在。

（4）尿素分解菌的代謝類型是異樣需氧型，尿素分解菌主要集中在培養(yǎng)液的上層，所以未經(jīng)振蕩而直接取上層懸液進(jìn)行梯度稀釋，用不同稀釋倍數(shù)的樣液接種到平板上進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比正確操作統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)偏大。

（5）微生物的分離和培養(yǎng)過(guò)程中，一定要注意無(wú)菌操作，防止雜菌污染，通常將菌落的形狀、大小、顏色等特征作為鑒定菌種的依據(jù)。

(6)制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。待平板冷卻凝固約5～10min后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上。

(7) 在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)變成藍(lán)色。