Question

【題目】結(jié)核分枝桿菌（M.tuberculosis），是引起結(jié)核病的病原菌。建國(guó)前結(jié)核病死亡率達(dá)200-300人/10萬(wàn)，建國(guó)后開(kāi)展了群防群治，兒童普遍接種卡介苗，其發(fā)病率和死亡率大為降低。臨床用藥前，有時(shí)需要做細(xì)菌相關(guān)耐藥實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）適于結(jié)核桿菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分一般含有___________________以及水和無(wú)機(jī)鹽，除了提供以上幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及___________的要求。

（2）若對(duì)結(jié)核桿菌進(jìn)行分離計(jì)數(shù)，需要將含有結(jié)核桿菌的菌液采用____________法接種于經(jīng)過(guò)_________滅菌后冷卻的固體培養(yǎng)基表面，這種接種方法的好處是___________。所有操作都應(yīng)在___________附近進(jìn)行。

（3）將分別含等劑量不同抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，結(jié)果濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，這說(shuō)明結(jié)核桿菌對(duì)實(shí)驗(yàn)所用抗生素表現(xiàn)為_____________（填“敏感”或“不敏感”）。

（4）接種卡介苗，可以降低結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率，所用的卡介苗屬于_________（填“抗原”、“抗體”）。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 氧氣 稀釋涂布平板 高壓蒸汽 可得到單個(gè)的菌落（或可將菌群分散成單個(gè)的細(xì)菌） 酒精燈火焰 敏感 抗原

【解析】

1、培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類型，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營(yíng)養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)具有適宜的pH值、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

2、稱藥品→溶解→調(diào)pH值→融化瓊脂→過(guò)濾分裝→包扎標(biāo)記→滅菌→擺斜面或倒平板。

3、卡介苗是用于預(yù)防結(jié)核病的疫苗。接種卡介苗后能使機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌產(chǎn)生特異性的免疫力，可阻止該病菌在人體內(nèi)的繁殖、播散，可以預(yù)防結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核

4、微生物接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者只能得到單菌落用于純化菌種，不能用于計(jì)數(shù)，而后者不僅能得到單菌落而且還可進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。

（1）由分析可知：培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)含有碳源、氮源以及水和無(wú)機(jī)鹽，除提供以上幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

（2）由于稀釋涂布平板法不僅能得到單菌落而且還可進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，故要對(duì)結(jié)核桿菌進(jìn)行分離計(jì)數(shù)，需采用稀釋涂布平板法接種于固體培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)基滅菌的方法通常采用高壓蒸汽滅菌法，冷卻后可用稀釋涂布平板法將結(jié)核桿菌的菌液經(jīng)梯度稀釋后進(jìn)行接種，這種接種方法的好處是可得到單個(gè)的菌落（或可將菌群分散成單個(gè)的細(xì)菌）。由于酒精燈火焰附近為無(wú)菌區(qū)，為了避免雜菌污染，故接種時(shí)在在酒精燈火焰附近進(jìn)行。

（3）由于濾紙圓片上含有不同抗生素，將圓片置于該平板上的不同位置，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間之后，在濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明抗生素抑制或消滅了結(jié)核桿菌，故這說(shuō)明結(jié)核桿菌對(duì)實(shí)驗(yàn)所用抗生素表現(xiàn)為敏感。

（4）卡介苗是減毒的結(jié)核桿菌，能刺激機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，使機(jī)體產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞，從而起到了預(yù)防感染結(jié)核桿菌的作用，可以降低結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率，故此卡介苗屬于抗原。