Question

限制酶是一種核酸切割酶，可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列．下圖為四種限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨識序列．箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合？其正確的末端互補序列為何？（　　）

• A、BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互補序列-AATT-
• B、BamHⅠ和HindⅢ；末端互補序列-GATC-
• C、EcoRⅠ和HindⅢ；末端互補序列-AATT-
• D、BamHⅠ和BglⅡ；末端互補序列-GATC-

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1．限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）是“分子手術(shù)刀”．來源：主要是從原核生物中分離純化出來的．功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性．結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．
2．解答本題的關(guān)鍵是理解限制酶的特點．切割目的基因和運載體時，一定要使用同一種限制性內(nèi)切酶，這樣，切出的切口才一樣，才能進(jìn)行堿基互補配對連接起來．兩個黏性末端只要一樣就可以進(jìn)行堿基互補配對，再通過DNA連接酶連接起來．

解答： 解：限制酶所識別的是特定的堿基序列，并在特定部位進(jìn)行切割，不同的限制酶識別不同的核苷酸序列并識別不同的切點，黏性末端不同．但不同的粘性末端有時是可以進(jìn)行拼接的，只要切下的游離堿基互補即可互補黏合，由圖示可知BamHI和BglII都可切下序列-GATC-，故末端互補序列-GATC-，故D正確．
故選：D．

點評：本題主要考查黏性末端的知識．解答本題的關(guān)鍵是理解限制酶的特點．限制酶所識別的是特定的堿基序列，并在特定部位進(jìn)行切割，限制酶不同，所識別的堿基序列不同，黏性末端不同，但不同的粘性末端有時是可以進(jìn)行拼接的，不要混淆．