Question

9．土壤中的細菌數(shù)量多、分布廣，包括自養(yǎng)細菌和異養(yǎng)細菌．自養(yǎng)細菌能直接利用光能或無機物氧化時所釋放的化學能同化CO₂合成有機物（例如硝化細菌），異養(yǎng)細菌從有機物中獲得能源和碳源（例如纖維素分解菌），人類根據(jù)需要從土壤中分離提純各種細菌．回答下列相關(guān)問題：
（1）培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基除了含有碳源外，還必須含有的基本成分是氮源、水、無機鹽、維生素．
（2）對培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌或高溫高壓滅菌．
（3）若要篩選硝化細菌，培養(yǎng)基中不應(yīng)該加入碳源，從功能上分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）若要鑒別所分離的細菌是否為纖維素分解菌，則應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入剛果紅，觀察培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進行液體擴大培養(yǎng)．培養(yǎng)時需要振蕩，其主要目的是供氧．
（5）純化菌種時，為了得到單菌落，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（6）細菌計數(shù)，根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計算得出的數(shù)目往往比實際數(shù)目低，原因是兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
（3）培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（4）選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．

解答 解：（1）不同的培養(yǎng)基都含有基本成分，水、無機鹽，碳源、氮源．
（2）對培養(yǎng)基滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌．
（3）硝化細菌能夠進行化能合成作用合成有機物，因此若要篩選硝化細菌，培養(yǎng)基中不應(yīng)該加入碳源，從功能上分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）若要鑒別所分離的細菌是否為纖維素分解菌，則應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入剛果紅，觀察培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進行液體擴大培養(yǎng)．培養(yǎng)時需要振蕩，其主要目的是供氧．
（5）純化菌種時，為了得到單菌落，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（6）細菌計數(shù)，由于兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計算得出的數(shù)目往往比實際數(shù)目低．
故答案為：
（1）氮源、水、無機鹽、維生素
（2）高壓蒸汽滅菌或高溫高壓滅菌        
（3）碳源       選擇
（4）剛果紅     供氧  
（5）稀釋涂布平板法     平板劃線法
（6）兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

點評 本題主要考查目的菌株的篩選、接種方法和培養(yǎng)基的配制注意事項等，意在強化學生對相關(guān)實驗操作的識記、理解與運用．