Question

【題目】近日，患罕見重癥“視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病”10年、雙目相繼失明的20歲女孩小易，在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院首次采用基因工程重組“蛋白A免疫吸附柱”進(jìn)行救治并獲得成功，她右眼得以重見光明，并于日前康復(fù)出院。請(qǐng)回答下列有關(guān)基因工程的問題：

（1）金黃色葡萄球菌蛋白A能夠特異性地與多種哺乳動(dòng)物的抗體結(jié)合，但金黃色葡萄球菌為致病菌，因此，通過規(guī)�；�培養(yǎng)金黃色葡萄球菌的方法來獲取蛋白A有一定風(fēng)險(xiǎn)，需要進(jìn)行基因工程操作來解決上述問題：將__________基因插入到基因工程最常用的運(yùn)載替____________中，需要用到的工具酶有____________。此過程屬于基因工程操作四步曲的第_____________步，即_____________。

（2）經(jīng)過上述操作后，選用大腸桿菌作為表達(dá)宿主菌，使其大量表達(dá)蛋白A并制成基因工程重組“蛋白A免疫吸附柱”。重組質(zhì)粒能夠整合到大腸桿菌的核DNA上，原因是_________________。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA所用的技術(shù)名稱為______________。

（3）將_____________類疾病患者的血漿輸入吸附柱，讓吸附柱上的基因工程重組葡萄球菌蛋白A分子，快速“抓住”并清除患者血漿中的致病性抗體，再讓凈化后的血液回輸?shù)饺梭w內(nèi)，如此循環(huán)往復(fù)，持續(xù)清除血液中的致病物質(zhì)，從而達(dá)到救治目的。

Answer 1

【答案】蛋白A合成（金黃色葡萄球菌蛋白A） 質(zhì)粒 限制酶和DNA連接酶 二 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 不同生物的DNA具有相似的結(jié)構(gòu) 分子雜交技術(shù) 自身免疫病

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。

（1）將目的基因即蛋白A合成基因插入到質(zhì)粒中，需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。這是基因工程操作四步曲的第二步，即基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

（2）重組質(zhì)粒能夠整合到大腸桿菌的核DNA上，原因是不同生物的DNA具有相似的結(jié)構(gòu)。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA所用的技術(shù)名稱為分子雜交技術(shù)。

（3）將疾病患者的血漿輸入吸附柱，讓柱子上的基因工程重組葡萄球菌蛋白A分子，快速“抓住”并清除患者血漿中的致病性抗體，再讓凈化后的血液回輸?shù)饺梭w內(nèi)，如此循環(huán)往復(fù)，持續(xù)清除血液中的致病物質(zhì)，從而達(dá)到救治自身免疫病患者的目的。