Question

11．IP10是人體某些細(xì)胞中表達(dá)的細(xì)胞因子，為探究IP10對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響，科學(xué)家進(jìn)行了有關(guān)研究．請(qǐng)分析回答：

（1）在機(jī)體抗腫瘤過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發(fā)揮一定作用，細(xì)胞免疫過程中主要的效應(yīng)細(xì)胞是效應(yīng)T細(xì)胞．
（2）獲取IP10基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒并導(dǎo)入乳腺腫瘤細(xì)胞，篩選成功表達(dá)IP10的細(xì)胞命名為IP10細(xì)胞，將IP10細(xì)胞、乳腺腫瘤細(xì)胞和導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細(xì)胞分別在體外培養(yǎng)，定期取樣、計(jì)數(shù)并繪制生長(zhǎng)曲線，結(jié)果如圖1，再將三種細(xì)胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長(zhǎng)狀況，結(jié)果如圖2．
①繪制生長(zhǎng)曲線時(shí)，對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)需要使用ac．
a．血細(xì)胞計(jì)數(shù)板　　b．固體平板培養(yǎng)基　　c．顯微鏡　　d．涂布器
②測(cè)定導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線的目的是：排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對(duì)乳腺腫瘤細(xì)胞增殖的影響．
③據(jù)圖分析，導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細(xì)胞的增殖無(wú)明顯影響，對(duì)體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)有明顯的
抑制作用．
（3）為進(jìn)一步探究IP10對(duì)腫瘤免疫的作用機(jī)理，從前面接種了三種不同細(xì)胞的小鼠體內(nèi)分離得到脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞，分別加入滅活的乳腺腫瘤細(xì)胞作為抗原，適宜條件下培養(yǎng)到54h時(shí)，在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入³H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，繼續(xù)培養(yǎng)18h后，收獲細(xì)胞并檢測(cè)其放射性，結(jié)果如圖3所示．
①在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入³H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的目的是：標(biāo)記的增殖細(xì)胞．
②對(duì)照組細(xì)胞的處理是：除不加入滅活的乳腺腫瘤細(xì)胞外，其他處理與實(shí)驗(yàn)組相同．
③實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明：IP10能促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖，從而發(fā)揮抗腫瘤作用．

Answer 1

分析 獲取IP10基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒并導(dǎo)入乳腺腫瘤細(xì)胞，篩選成功表達(dá)IP10的細(xì)胞命名為IP10細(xì)胞，將IP10細(xì)胞、乳腺腫瘤細(xì)胞和導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細(xì)胞分別在體外培養(yǎng)，定期取樣、計(jì)數(shù)并繪制生長(zhǎng)曲線，結(jié)果如圖1，從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢(shì)基本一致，所以導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細(xì)胞的增殖沒有明顯影響．再將三種細(xì)胞分別接種于健康小鼠乳腺部位皮下，觀察小鼠腫瘤生長(zhǎng)狀況，結(jié)果如圖2．從圖2中可以看出，導(dǎo)入了IP10基因的細(xì)胞使小鼠產(chǎn)生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對(duì)體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用．從圖3中可以看出“接種IP10細(xì)胞的小鼠”實(shí)驗(yàn)組的放射性強(qiáng)度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤的作用．

解答 解：（1）在機(jī)體抗腫瘤的過程中，特異性免疫和非特異性免疫均發(fā)揮作用．細(xì)胞免疫過程中，效應(yīng)T細(xì)胞與被抗原入侵的宿主細(xì)胞（即靶細(xì)胞）密切接觸，導(dǎo)致靶細(xì)胞裂解死亡．
（2）①在對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，常采用抽樣檢測(cè)法，需要使用血球計(jì)數(shù)板和顯微鏡．
②在將IP10基因?qū)�入到乳腺腫瘤細(xì)胞中時(shí)，是連在質(zhì)粒上導(dǎo)入的，那么在出現(xiàn)相應(yīng)的性狀變化時(shí)，也有可能是質(zhì)粒本身所導(dǎo)致的；在導(dǎo)入細(xì)胞的過程中，也可能會(huì)有未連接目的基因的空質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞．所以，測(cè)定導(dǎo)入空質(zhì)粒的乳腺腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線就是為了排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對(duì)乳腺腫瘤細(xì)胞增殖的影響．
③圖1是對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行的測(cè)定，圖2是對(duì)接種于小鼠體內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行的測(cè)定．
從圖1中可以看出三條曲線的變化趨勢(shì)基本一致，所以導(dǎo)入IP10基因?qū)�體外培養(yǎng)的乳腺腫瘤細(xì)胞的增殖沒有明顯影響．從圖2中可以看出，導(dǎo)入了IP10基因的細(xì)胞使小鼠產(chǎn)生的腫瘤明顯小于其他兩組，所以它對(duì)體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用．
（3）①由于3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸是構(gòu)成DNA的基本單位．細(xì)胞增殖時(shí)會(huì)進(jìn)行DNA的復(fù)制，由于此時(shí)會(huì)利用3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，所以增殖產(chǎn)生的細(xì)胞就會(huì)被放射性標(biāo)記．
②該實(shí)驗(yàn)以放射性強(qiáng)度（反映淋巴細(xì)胞的增殖情況）作為檢測(cè)指標(biāo)，加入滅活的乳腺腫瘤細(xì)胞作為抗原刺激淋巴細(xì)胞增殖，為排除其他因素導(dǎo)致的淋巴細(xì)胞增殖對(duì)結(jié)果的干擾，所以應(yīng)該設(shè)置不加抗原的一組作為對(duì)照組．
③由第①可知，放射性強(qiáng)度越高，則淋巴細(xì)胞的增殖能力越強(qiáng)．從圖3中可以看出“接種IP10細(xì)胞的小鼠”實(shí)驗(yàn)組的放射性強(qiáng)度明顯高于其他組，可見IP10基因能夠促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤的作用．
故答案為：
（1）非特異性免疫  T細(xì)胞
（2）①a、c
②排除導(dǎo)入的空質(zhì)粒對(duì)乳腺腫瘤細(xì)胞增殖的影響
③無(wú)明顯影響   抑制
（3）①增殖
②滅活的乳腺腫瘤細(xì)胞
③促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖

點(diǎn)評(píng) 結(jié)合IP10對(duì)腫瘤細(xì)胞免疫應(yīng)答考查細(xì)胞免疫和體液免疫以及對(duì)照試驗(yàn)的設(shè)置和分析，主要考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的讀圖和綜合分析能力．