Question

研究發(fā)現(xiàn)：端粒在不同物種細(xì)胞中對(duì)于保持染色體穩(wěn)定性和細(xì)胞活性有重要作用，端粒酶是一種逆轉(zhuǎn)錄酶，能延長(zhǎng)縮短的端粒（縮短的端粒其細(xì)胞復(fù)制能力受限），從而增強(qiáng)體外細(xì)胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉(zhuǎn)化�？茖W(xué)家通過(guò)探究DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖以尋找一種抑制腫瘤細(xì)胞的新途徑。

    方法思路：

    ①構(gòu)建干擾質(zhì)粒                   （插入針對(duì)人體端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶亞基（hTERT）的mRNA的干擾序列）和對(duì)照質(zhì)粒PSG—CTR（插入不針對(duì)人體任何mRNA序列的對(duì)照組序列）。

    ②將空質(zhì)粒PSG（不含目的基因）、干擾質(zhì)粒和對(duì)照質(zhì)粒分別感染肝癌細(xì)胞。

    ③一段時(shí)間后觀察檢測(cè)細(xì)胞的                             。計(jì)算細(xì)胞凋亡率，繪制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。結(jié)果如下圖：

   

請(qǐng)回答：

   （1）完成實(shí)驗(yàn)步驟中的空格：

        ①                        ；②                        。

   （2）在構(gòu)建質(zhì)粒時(shí)，要將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞并用               培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構(gòu)建的表達(dá)載體質(zhì)粒上必須含有                。

   （3）端粒酶可以通過(guò)以自身的           為模板，                    為原料來(lái)合成端粒DNA。

（4）根據(jù)題意請(qǐng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果并得出結(jié)論。

                                                                               

                                                                            。

 

Answer 1

【答案】

（1）①PSG－AS  ③端粒酶活性、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長(zhǎng)情況

（2）選擇  標(biāo)記基因

（3）RNA   4種脫氧核苷酸

（4）從結(jié)果可知PSG-AS導(dǎo)入肝癌細(xì)胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細(xì)胞凋亡率升高，細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，說(shuō)明通過(guò)DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細(xì)胞。

 

【解析】略