Question

庫(kù)爾勒香梨果實(shí)中存在游離態(tài)和結(jié)合態(tài)兩大類呈香物質(zhì)．結(jié)合態(tài)呈香物質(zhì)大部分以糖苷形式存在，本身沒有香氣，但在β-D-葡萄糖苷酶的作用下能分解釋放出具有揮發(fā)性的游離態(tài)呈香物質(zhì)．若香梨在貯藏期間上述轉(zhuǎn)變過程迅速，會(huì)導(dǎo)致部分香氣成分喪失，影響果實(shí)的風(fēng)味和品質(zhì)．科研人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)（實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示），請(qǐng)分析回答：

（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是

 

．對(duì)硝基苯-β-D-葡萄糖苷（pNPG）β-D-葡萄糖苷酶一定條件對(duì)硝基苯酚
（2）本實(shí)驗(yàn)中，檢測(cè)的原理如下：

①對(duì)硝基苯-β-D-葡萄糖苷（pNPG）與香梨中的

 

分子結(jié)構(gòu)相似，能在β-D-葡萄糖苷酶作用下生成對(duì)硝基苯酚，對(duì)硝基苯酚在堿性條件下顯黃色．
②由于不同香梨中的

 

不同，以上反應(yīng)完成后，在堿性條件下呈現(xiàn)的黃色深淺不同，在對(duì)硝基苯酚的最佳吸收波長(zhǎng)處測(cè)定的吸光值也不同．與事先配制好的對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的

 

進(jìn)行比較，確定

 

含量，然后推算出

 

．
（3）實(shí)驗(yàn)步驟：
提取樣液：定期稱取不同貯藏條件下的香梨10.0g，立即在液氮下研磨成粉末，加入經(jīng)適量預(yù)冷的pH 6.0緩沖液，在冰浴下研磨成勻漿，于4℃條件下離心獲得的上清液即為β-D-葡萄糖苷酶粗提取液，用pH 6.0緩沖液定容至10mL，置于4℃條件下保存?zhèn)溆茫畽z測(cè)樣液：在10mL試管中依次加入0.6mL緩沖液，1.0mL酶粗提取液和0.2mL10mmol/L pNPG混合均勻，迅速蓋上試管塞后立即放到37℃條件下反應(yīng)60min后，加入Na₂CO₃終止反應(yīng)，然后在對(duì)硝基苯酚的最佳吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光值．
①提取樣液過程必須在低溫條件下進(jìn)行的原因是

 

．
②檢測(cè)樣液時(shí)，酶促反應(yīng)需控制在pH 6.0，37℃條件下完成，其最可能的原因是

 

．
（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
在四種不同條件下貯藏的香梨中游離態(tài)呈香物質(zhì)均在貯藏

 

天時(shí)相對(duì)較多，在

 

貯藏時(shí)，香梨的風(fēng)味和品質(zhì)最佳．

Answer 1

考點(diǎn)：探究影響酶活性的因素,酶活力測(cè)定的一般原理和方法

專題：

分析：分析曲線圖：圖示表示不同儲(chǔ)藏條件下，在對(duì)硝基苯酚的最佳吸收波長(zhǎng)處測(cè)定的吸光值．在四種不同條件下儲(chǔ)藏的香梨中，游離態(tài)呈香物質(zhì)均約在儲(chǔ)藏40天時(shí)相對(duì)較多．在1%涂膜儲(chǔ)藏時(shí)，在對(duì)硝基苯酚的最佳吸收波長(zhǎng)處測(cè)定的吸光值最小，因此該條件下香梨的風(fēng)味和品質(zhì)最佳．

解答： 解：（1）該實(shí)驗(yàn)的自變量是庫(kù)爾勒香梨果實(shí)的儲(chǔ)存條件，因變量是β-D-葡萄糖苷酶含量變化（β-D-葡萄糖苷酶活性），因此，此實(shí)驗(yàn)的目的是研究不同儲(chǔ)存條件下β-D-葡萄糖苷酶含量（β-D-葡萄糖苷酶活性）的變化規(guī)律或探究不同儲(chǔ)存條件對(duì)β-D-葡萄糖苷酶含量（β-D-葡萄糖苷酶活性）的影響．
（2）①對(duì)硝基苯-β-D-葡萄糖苷（pNPG）與香梨中的結(jié)合態(tài)呈香物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)相似．
②根據(jù)實(shí)驗(yàn)步驟三，由于不同香梨中的β-D-葡萄糖苷酶的含量不同，以上反應(yīng)完成后，在堿性條件下呈現(xiàn)的黃色深淺不同，在對(duì)硝基苯酚的最佳吸收波長(zhǎng)處測(cè)定的吸光值也不同．與事先配制好的對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的顏色進(jìn)行比較，確定對(duì)硝基苯酚含量，然后推算出β-D-葡萄糖苷酶的含量（β-D-葡萄糖苷酶的活性）．
（3）①提取樣液過程必須在低溫條件下進(jìn)行的原因是保持β-D-葡萄糖苷酶含量或抑制β-D-葡萄糖苷酶失活，排除溫度對(duì)酶活性的影響，以提高實(shí)驗(yàn)的精確度．
②為保證酶的活性，檢測(cè)樣液時(shí)，酶促反應(yīng)需控制在最適條件下．
（4）根據(jù)曲線變化規(guī)律可知，在四種不同條件下儲(chǔ)藏的香梨中，游離態(tài)呈香物質(zhì)均約在儲(chǔ)藏40天時(shí)相對(duì)較多，在1%涂膜儲(chǔ)藏時(shí)，香梨的風(fēng)味和品質(zhì)最佳．
故答案為：
（1）研究不同貯存條件下β-D-葡萄糖苷酶含量（β-D-葡萄糖苷酶活性）的變化規(guī)律或探究不同貯存條件對(duì)β-D-葡萄糖苷酶含量（β-D-葡萄糖苷酶活性）的影響
（2）①結(jié)合態(tài)的呈香物質(zhì)
②β-D-葡萄糖苷酶的含量   顏色（或吸光值） 對(duì)硝基苯酚  β-D-葡萄糖苷酶的含量（β-D-葡萄糖苷酶的活性）
（3）①保持β-D-葡萄糖苷酶含量（抑制β-D-葡萄糖苷酶失活、排除溫度對(duì)酶活性的影響）
②此條件下酶的活性最高（pH 6.0是β-D-葡萄糖苷酶的最適pH，37℃是β-D-葡萄糖苷酶的最適溫度）
（4）40    1%涂膜

點(diǎn)評(píng)：本題以庫(kù)爾勒香梨果實(shí)的呈香物質(zhì)為素材，結(jié)合曲線圖，考查探究影響酶促反應(yīng)速率的因素，要求考生認(rèn)真審題，明確實(shí)驗(yàn)的目的，能正確區(qū)分實(shí)驗(yàn)的自變量和因變量；同時(shí)還要求考生能分析曲線圖，從中提取有效信息，得出正確的結(jié)論．