Question

【題目】基因治療是指將外源正�；�因導入靶細胞，以糾正或補償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達到治療的目的。干擾素基因缺失的小鼠不能產生成熟淋巴細胞，科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的小鼠進行了基因治療。請回答：

（1）為使干擾素基因在小鼠細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達載體的_______________和_______________之間。

（2）將干擾素基因導入ES細胞的方法是___________，采用___________可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為___________。導入ES細胞而不是導入上皮細胞是因為ES細胞在功能上具有___________。

（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細菌導致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的___________功能。

（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正�；�因導入有基因缺陷的細胞中，以表達出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產生的mRNA分子與病變基因產生的___________進行互補結合，來阻斷非正常蛋白質的合成；第三類是編碼可以殺死癌細胞的蛋白酶基因。

Answer 1

【答案】 啟動子 終止子 顯微注射技術 DNA分子雜交 體外基因治療 發(fā)育的全能性 防衛(wèi) mRNA

【解析】試題分析：基因工程技術的基本步驟：目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成�；�因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）來自cDNA文庫的基因是通過逆轉錄得到的，無啟動子和終止子等，將其插入在表達載體的啟動子和終止子之間才能構成完整的基因并在受體細胞內表達。

（2）干擾素基因為目的基因，將目的基因導入受體細胞（ES細胞）常用顯微注射技術。采用DNA分子雜交可以鑒定目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA分子上，再將能正常表達干擾素的細胞轉入到小鼠體內，這種治療方法稱為體外基因治療。ES細胞又叫胚胎干細胞，具有發(fā)育的全能性。

（3）淋巴細胞參與機體的體液免疫和細胞免疫，與免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能有關。

（4）反義基因是通過產生的mRNA分子與病變基因產生的mRNA進行互補結合形成的。