Question

【題目】已知多酚氧化酶能催化化學(xué)反應(yīng)：兒茶酚+氧氣→苯醌+水的進(jìn)行，某研究組開展了多酚氧化酶研究實驗，實驗步驟如下：

①多酚氧化酶制備:

稱取一定質(zhì)量的馬鈴薯塊莖，用勻漿機(jī)打碎制成勻漿并過濾得濾液，濾液在用一定濃度的硫酸銨處理

多次，離心收集沉淀，沉淀溶于一定濃度的磷酸緩沖液，獲得酶液。

②酶活性測定

在10個反應(yīng)杯中分別加入 的兒茶酚溶液，然后在1號反應(yīng)杯中加入 ，以此類推，10號反應(yīng)杯中加入20μL的酶液（初始量為2μL的酶液），然后在相同時間內(nèi)利用測氧儀測定實驗數(shù)據(jù)，并分析。

請分析下列問題：

（1）在多酚氧化酶制備步驟中，一定濃度的硫酸銨的作用是 。

（2）將實驗步驟中酶活性測定的內(nèi)容補(bǔ)充完整： ， 。

（3）本實驗的因變量是 。

（4）試預(yù)測實驗可能出現(xiàn)的三種實驗結(jié)果：

① 。

② 。

③ 。

Answer 1

【答案】

（1）去除雜質(zhì)提純酶同時保證酶不變性

（2）等量 2μL酶液加18μL磷酸鹽緩沖液

（3）單位時間耗氧量

（4）隨著酶量增加，單位時間耗氧量不變

隨著酶量增加，單位時間耗氧量增加

隨著酶量增加，單位時間耗氧量先增加后保持不變

【解析】

（1）本實驗需要具有活性的酶，所以一定濃度的硫酸銨的作用是去除雜質(zhì)提純酶同時保證酶不變性。

（2）本實驗的自變量是不同量的多酚氧化酶，所以在10個反應(yīng)杯中反應(yīng)底物量應(yīng)相同。因反應(yīng)體系的量要保持相同，初始量為2μL的酶液，又因為在酶制備中可知，酶液是用磷酸緩沖液配制，所以1號反應(yīng)杯中應(yīng)加入2μL酶液加18μL磷酸鹽緩沖液。

（3）根據(jù)實驗步驟可知，本實驗的因變量是單位時間耗氧量

（4）因為不知反應(yīng)底物量的多少和酶量的多少，所以可能出現(xiàn)的結(jié)果有：如果底物量少，酶量多，則一開始就達(dá)到最大反應(yīng)速率，所以隨著酶量增加，單位時間耗氧量不變；如果底物量很大，則隨著酶量增加，單位時間耗氧量增加；如果底物量有限，則隨著酶量增加，單位時間耗氧量先增加后不變