Question

13．運用現(xiàn)代生物技術的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉移到優(yōu)質油菜中，培育出轉基因抗蟲的油菜品種．這一品種在生長過程中能產生特異的殺蟲蛋白，對菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產量，減少農藥使用，保護農業(yè)生態(tài)環(huán)境．

（1）將Bt毒蛋白基因從蘇云金芽孢桿菌DNA中剪切出來的“分子手術刀”是限制酶，它能使雙鏈DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵鍵斷開：該基因表達載體中除了Bt毒蛋白基因外，還必須有啟動子、終止子以及標記基因等．
（2）將目的基因導入受體細胞的方法有很多種，題中所用的是農桿菌轉化法．
（3）轉基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲．
（4）已知轉基因油菜中殺蟲蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞表面無（相應的）特異性受體．
（5）轉基因油菜獲得的抗蟲性狀是由Bt毒蛋白基因的表達 產物來體現(xiàn)的，蘇云金芽孢桿菌中的Bt毒蛋白基因和油菜細胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和氨基酸序列上是相同的．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將目的基因（Bt毒蛋白基因）從外源DNA中剪切出來的“分子手術刀”是限制酶，它能使雙鏈DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；基因表達載體的組成包括目的基因（Bt毒蛋白基因）、啟動子、終止子以及標記基因等．
（2）由圖可知，題中將目的基因導入受體細胞的方法農桿菌轉化法．
（3）轉基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲，若害蟲死亡則說明培育成功．
（4）已知轉基因油菜中殺蟲蛋白只結合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞表面無（相應的）特異性受體．
（5）轉基因油菜獲得的抗蟲性狀是由Bt毒蛋白基因的表達產物來體現(xiàn)的，蘇云金芽孢桿菌中的Bt毒蛋白基因和油菜細胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和
氨基酸序列上是相同的．
故答案為：
（1）限制酶     磷酸二酯鍵     標記基因
（2）農桿菌轉化法
（3）用該油菜葉飼喂害蟲
（4）無（相應的）特異性受體
（5）抗蟲性狀    氨基酸

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．