Question

３５. 回答有關(guān)“基因工程”方面的問題（共10分）

I．請分析下面一項(xiàng)專利：

申請專利號	03109739.1	專利申請日	2003.04.14
名稱	利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)胰島素的方法	公開號	1458161
公開日	2003.11.26[	申請（專利權(quán)）	林忠平
地址	北京市北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院	發(fā)明（設(shè)計(jì)）人	林忠平、倪挻、陳溪、胡雷
專利摘要	本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛密碼子的原則來設(shè)計(jì)所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細(xì)胞中的降解。將該基因置于CaMV35S啟動子和果實(shí)專一性啟動子2A12的驅(qū)動之下通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實(shí)中表達(dá)人胰島素。

（１）此基因工程中，目的基因是               。檢測受體細(xì)胞中是否存在目的基因，方法有               。這項(xiàng)專利所依據(jù)的遺傳學(xué)原理主要是                  。

（２）重組時(shí)，在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列的目的是                     。

（３）為了防止目的基因通過花粉轉(zhuǎn)移到其他植物，應(yīng)該把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的

                 中。

II．下圖描述的是上述利用轉(zhuǎn)基因番茄獲得產(chǎn)品的過程。已知限制酶a的識別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC— ，限制酶b的識別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—。

 

 

 

                                      

（１）圖中①的過程是______過程。

（２）圖中②的過程，在基因工程中的步驟是________________。

（３）目的基因與農(nóng)桿菌質(zhì)粒重組過程中，對符合設(shè)計(jì)要求的質(zhì)粒進(jìn)行酶切。請畫出農(nóng)桿菌質(zhì)粒被限制酶a切割后所形成的兩個(gè)DNA片段末端堿基序列______________。

（４）目的基因?qū)�入�?xì)胞后要成功表達(dá)，需經(jīng)歷______和______兩個(gè)過程。

Answer 1

（1）人胰島素基因；受體細(xì)胞中是否具有某些標(biāo)記基因；堿基互補(bǔ)配對

（2）使合成的胰島素在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存，以免被降解  （3）葉綠體或線粒體

（4）逆轉(zhuǎn)錄   （5）將重組DNA分子（重組質(zhì)粒）導(dǎo)入受體細(xì)胞

（6）- G          GATCC -

      |       和       |

    - CCTAC          G -

（7）轉(zhuǎn)錄；翻譯