Question

【題目】尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)_________（填“能”或“不能”）分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，原因是________________________________________。

（2）接種前要對培養(yǎng)基進(jìn)行___________。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在_______條件下進(jìn)行。

（3）一位同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_________________，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可以避免此種現(xiàn)象？______________________________________。

（4）獲取分解尿素的細(xì)菌后，如要臨時保存，可將其接種在___________培養(yǎng)基上，等長成菌落后放在4 ℃的冰箱中保存。若要長期保存，可以采用___________的方法。

Answer 1

【答案】不能 培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源 滅菌 無菌 菌液濃度過高 對菌液進(jìn)行梯度稀釋（加大稀釋倍數(shù)） 固體斜面 甘油管藏

【解析】

根據(jù)題表中培養(yǎng)基配方可知，蛋白胨和尿素可提供氮源，葡萄糖可提供碳源，含有瓊脂，故該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基；尿素分解菌體內(nèi)的脲酶能夠?qū)⑼寥乐械哪蛩胤纸鉃榘�，尿素分解菌屬于�?xì)菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。

（1）由圖中培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基中能提供氮源的是蛋白胨和尿素，尿素不是唯一氮源，不能利用尿素的菌可以以蛋白胨為氮源生長，所以不能分離出分解尿素的菌。

（2）微生物篩選與分離成功的關(guān)鍵是無菌操作，因此，接種前要對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無菌條件下進(jìn)行。

（3）培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液沒有梯度稀釋，濃度過高；要避免此種現(xiàn)象，需要對菌液進(jìn)行梯度稀釋。

（4）獲取分解尿素的細(xì)菌后，如要臨時保存，可將其接種在固體斜面培養(yǎng)基上，等長成菌落后放在4 ℃的冰箱中保存。若要長期保存，可以采用甘油管藏的方法。