Question

【題目】人的血清白蛋白在臨床上需求量很大�？茖W(xué)家培養(yǎng)出一種轉(zhuǎn)基因山羊，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到尿液中。據(jù)此回答下列問題：

（1）若要體外獲得大量的人血清白蛋白基因，可采用PCR技術(shù)。該技術(shù)的前提是要根據(jù)一段已知目的基因的_____________________設(shè)計(jì)引物，而后經(jīng)過變性、復(fù)性和_______________三個(gè)步驟的循環(huán)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。若該目的基因循環(huán)擴(kuò)增4次，理論上需要消耗_________個(gè)引物。

（2）如果用山羊某個(gè)時(shí)期的____________反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種雙鏈cDNA片段與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中,這個(gè)受體菌群就叫做山羊的___________________。

（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，一般情況下質(zhì)粒和目的基因需用________________進(jìn)行切割。構(gòu)建的重組質(zhì)粒上的啟動(dòng)子是______________________識(shí)別和結(jié)合的部位。

（4）將重組質(zhì)粒通過_______________法導(dǎo)入山羊的受體細(xì)胞時(shí)，常選用受精卵作為受體細(xì)胞的主要原因是________________________________________________。

（5）人的血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)的原因是__________。在轉(zhuǎn)基因山羊體內(nèi)人的血清白蛋白基因只在膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)之一是____________________________________________。

Answer 1

【答案】核苷酸序列 延伸 30 mRNA（信使RNA） cDNA文庫(kù)(或部分基因文庫(kù)) 同種限制酶 RNA聚合酶 顯微注射 受精卵具有發(fā)育的全能性 生物界共用一套遺傳密碼子 有利于分離提取血清白蛋白（或：對(duì)山羊的干擾最小）

【解析】

1、PCR原理：利用DNA雙鏈復(fù)制原理，將基因的核苷酸序列不斷地加以復(fù)制，使其數(shù)量呈指數(shù)方式增加。

2、基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和cDNA文庫(kù)，其中基因組文庫(kù)包含一種生物的所有基因，而cDNA文庫(kù)中只包含該種生物部分基因。

3、基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）②基因的 “針線”---DNA連接酶③基因的運(yùn)載體---質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；對(duì)目的基因擴(kuò)增需要變性、復(fù)性和延伸三個(gè)步驟；如果該目的基因循環(huán)擴(kuò)增4次，則得到16個(gè)DNA分子，32條DNA鏈，除了最初2條模板鏈上沒有引物，其余30條DNA鏈上均有引物。

（2）利用mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種雙鏈cDNA片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中,這個(gè)受體菌群就叫做cDNA文庫(kù)(或部分基因文庫(kù))。

（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，一般情況下質(zhì)粒和目的基因需用同種限制酶進(jìn)行切割，以形成相同的黏性末端；構(gòu)建的重組質(zhì)粒上的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。

（4）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物的受體細(xì)胞通過顯微注射法法；常選用受精卵作為受體細(xì)胞，主要原因是動(dòng)物細(xì)胞受精卵具有發(fā)育的全能性。

（5）由于生物界共用一套遺傳密碼子，所以人的血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)；在轉(zhuǎn)基因山羊體內(nèi)人的血清白蛋白基因只在膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)之一是有利于分離提取血清白蛋白或?qū)ι窖虻母蓴_最小。