Question

【題目】抗體是一種由漿細(xì)胞分泌，可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的球蛋白。下列是通過生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式，請回答相關(guān)問題：

（1）與植物細(xì)胞融合相比較，途徑1中的過程①特有的誘導(dǎo)方式是用_______________處理，過程②需要經(jīng)過兩次篩選，其最終的目的是________________。

（2）在途徑2中，將mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA再進(jìn)行PCR擴(kuò)增被稱為RT-PCR技術(shù)，RT-PCR過程需要的酶有___________________；利用此技術(shù)擴(kuò)增X基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____________________；同時(shí)為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_________________________。

（3）1991年，英國科學(xué)家將人的α1-抗胰蛋白酶基因?qū)�入綿羊受精卵中，成功從其中4只轉(zhuǎn)基因母綿羊的乳汁中獲得了藥用的α1-抗胰蛋白酶。這些藥物蛋白質(zhì)的活性比上述轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)的蛋白質(zhì)高且穩(wěn)定，原因是：______________________________。

Answer 1

【答案】滅活的病毒 篩選出能產(chǎn)生所需特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶 X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列 使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連 與細(xì)菌相比，哺乳動物的乳腺細(xì)胞含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，可對分泌蛋白質(zhì)進(jìn)行修飾、加工

【解析】

據(jù)圖分析，圖示為制備單克隆抗體的兩個(gè)過程，其中①表示動物細(xì)胞融合，即骨髓瘤細(xì)胞與細(xì)胞A（已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞）融合的過程，形成的Y細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞；②表示動物細(xì)胞培養(yǎng)和篩選的過程；③表示從漿細(xì)胞中提取mRNA的過程；④表示逆轉(zhuǎn)錄形成X基因（控制抗體合成的基因）的過程；⑤構(gòu)建基因表達(dá)載體（結(jié)構(gòu)甲）的過程，⑥表示將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程。

（1）途徑1中的過程①表示動物細(xì)胞融合，與植物細(xì)胞融合相比，其特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理；過程②需要經(jīng)過兩次篩選，最終得到的是能產(chǎn)生所需特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（2）通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA的過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增cDNA的過程中，需要用到耐高溫的DNA聚合酶，即Taq酶；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列；為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，進(jìn)而使X基因能定向插入表達(dá)載體，并減少自連。

（3）與細(xì)菌相比，哺乳動物的乳腺細(xì)胞含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，可對分泌蛋白質(zhì)進(jìn)行修飾、加工，所以利用綿羊受精卵為受體細(xì)胞獲得的藥物蛋白質(zhì)的活性比上述轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)的蛋白質(zhì)高且穩(wěn)定。