Question

【題目】I．小麥銹病是導(dǎo)致小麥減產(chǎn)的原因之一。科學(xué)家在進(jìn)行野外考察時(shí)，發(fā)現(xiàn)有一種山羊草抗銹病能力較強(qiáng)，他們期望借此培育出一種抗銹病的小麥新品種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）抗銹病基因是本實(shí)驗(yàn)的目的基因。目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有______的因子。

（2）科學(xué)家從這種山羊草某時(shí)期的細(xì)胞中提取mRNA，采用 ___法等獲得了包含有抗銹病基因的序列。這樣的序列叫 ___（選填“基因組文庫(kù)”或“cDNA文庫(kù)”或“cDNA”）。

（3）在將抗銹病基因?qū)�入小麥�?xì)胞時(shí)，難以采用花粉管通道法的原因是____。

（4）獲得轉(zhuǎn)基因小麥后，科學(xué)家通常通過(guò)____（選填“DNA分子雜交技術(shù)”或“抗原——抗體雜交”或“抗病的接種實(shí)驗(yàn)”）的方法判斷實(shí)驗(yàn)是否最終成功。

Ⅱ．1997年，英國(guó)學(xué)者韋爾穆特等宣布，用成年綿羊乳腺細(xì)胞培育出體細(xì)胞核移植后代——多利羊。多利羊的出生在生物界曾引起巨大的轟動(dòng)。

（1）多利羊的培育成功，證明了____（從動(dòng)物的生殖和發(fā)育角度分析）。

（2）除了從乳腺中分離出體細(xì)胞外，科學(xué)家們還可以從動(dòng)物的非生殖腺組織中獲得體細(xì)胞。其中重要的一步是要用 ___處理組織塊，以獲得細(xì)胞懸液。

Answer 1

【答案】調(diào)控作用 逆（反）轉(zhuǎn)錄 cDNA 花小，難以操作 抗病的接種實(shí)驗(yàn) （高度分化的）動(dòng)物細(xì)胞（核）具有全能性 胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

I．（1）目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。

（2）從山羊草細(xì)胞中提取mRNA，以此mRNA為模板采用逆（反）轉(zhuǎn)錄法等獲得包含有抗銹病基因的序列。這樣的序列叫cDNA。

（3）由于小麥的花小，難以操作等原因，在將抗銹病基因?qū)�入小麥�?xì)胞時(shí)，很難采用花粉管通道法。

（4）抗銹病轉(zhuǎn)基因小麥培育成功的標(biāo)志是具備抗銹病能力，因此獲得轉(zhuǎn)基因小麥后，科學(xué)家通常通過(guò)抗病的接種實(shí)驗(yàn)的方法判斷實(shí)驗(yàn)是否最終成功。

Ⅱ．（1）多利羊的培育成功，證明了（高度分化的）動(dòng)物細(xì)胞（核）具有全能性。

（2）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先將組織分散成許多單個(gè)細(xì)胞。方法是從健康動(dòng)物體內(nèi)取出組織塊，剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間，這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞，從而獲得細(xì)胞懸液。