Question

【題目】（一)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株。回答問題：

(1)無菌操作是微生物實(shí)驗(yàn)中重要的一項(xiàng)技術(shù)，下列常用的無菌操作中錯誤的是（_____）

A.用酒精擦拭雙手

B.用氯氣消毒水源

C.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行

D.玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）可用酒精擦拭

(2)在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_______為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

(3)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即__________和_______。

(4)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力____________。

(二)為了更好地分解石油，通過基因工程產(chǎn)生超級細(xì)菌。下圖a表示基因工程中經(jīng)常選用的載體——pBR322質(zhì)粒,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Tetr表示四環(huán)素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中，將使該基因失活，而不再具有相應(yīng)的抗性。為了檢査載體是否導(dǎo)入原本沒有Ampr和Tetr的大腸桿菌(受體細(xì)胞），將大腸桿菌涂布在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b的結(jié)果(黑點(diǎn)表示菌落）。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖c的結(jié)果（空圈表示與b對照無菌落的位置）。據(jù)此分析并回答：

(1)將重組的DNA分子導(dǎo)人受體細(xì)胞時，用________處理大腸桿菌，增大____________。

(2)pBR322質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是_______，其控制著__________等性狀。與圖c空圏相對應(yīng)的圖b中的菌落表現(xiàn)型是___________，由此說明目的基因插入了_____________中。

(3)基因工程成功的標(biāo)志是_______________________。

Answer 1

【答案】 D 原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 大 氯化鈣 細(xì)胞壁的通透性 DNA 抗氨芐青霉素和抗四環(huán)素 能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素 Tetr 目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)

【解析】試題分析：微生物接種常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。培養(yǎng)基按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，要選擇出某一特定的菌種，需要提供目的菌生長的必要條件，并抑制或阻止其他微生物的生長，要鑒別某一目的菌，需要用特別的試劑進(jìn)行檢驗(yàn)，通過觀察現(xiàn)象來確定。分析題圖：a表示質(zhì)粒，其本質(zhì)是雙鏈環(huán)狀DNA分子，其上含有標(biāo)記基因Amrr、Tetr；b培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素，能在b上生存的是能抗氨芐青霉素的大腸桿菌，即含有Amrr；c培養(yǎng)基中含有四環(huán)素，能在該培養(yǎng)基上生存的是能抗四環(huán)素的大腸桿菌，即含有Tetr。

（一)（1）用酒精擦拭雙手屬于化學(xué)藥劑消毒，A正確；用氯氣消毒水源屬于化學(xué)藥劑消毒，B正確；實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近，因?yàn)楦邷胤乐闺s菌污染，C正確；玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）等應(yīng)用干熱滅菌，酒精擦拭屬于消毒，不能殺滅所有微生物，D錯誤。

（2）篩選能分解原油的菌種應(yīng)以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（3）純化菌種常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（4）分解圈越大說明利用原油的能力越大，降解能力越強(qiáng)。

（二)（1）將重組的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞時，需要先用氯化鈣處理，增大其細(xì)胞壁的通透性。

（2）pBR322質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)是雙鏈環(huán)狀DNA分子，其結(jié)構(gòu)上的Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因，所以該質(zhì)粒有抗氨芐青霉素和抗四環(huán)素的能力。圖b中的菌落能抗氨芐青霉素，圖c中的實(shí)心圈能抗氨芐青霉素和四環(huán)素，所以與圖c空圈相對應(yīng)的圖b中的菌落能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素，由此說明目的基因插入了四環(huán)素抗性基因（Tetr）中。

（3）基因工程成功的標(biāo)志是目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)出相關(guān)的蛋白質(zhì)。