Question

【題目】前列腺癌是發(fā)生在前列腺上皮的惡性腫瘤，可分為雄性激素依賴性和雄性激素非依賴性兩種類型。請回答下列問題。

（1）研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌發(fā)生的根本原因是外界致癌因子引起了__________，可能還與飲食習(xí)慣等因素有關(guān)。

（2）為了探究奧曲肽對兩種前列腺癌的治療效果，研究者對體外培養(yǎng)的人前列腺癌DU145和LNCaP細(xì)胞采用不同劑量奧曲肽（0、0.1、1、10、100和1000nmol/L）處理，分別于24h、48h、72h測定并計算細(xì)胞增殖抑制率，結(jié)果如下圖所示。

注：DU154是雄性激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞；LNCaPj 雄性激素依賴性前列腺癌細(xì)胞。

①在培養(yǎng)過程中，動物細(xì)胞具有__________生長的特點(diǎn)，當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞增殖到一定程度時，會出現(xiàn)__________現(xiàn)象，因此要對其進(jìn)行傳代培養(yǎng)，通常需要用__________酶處理，使細(xì)胞分散開以備新的細(xì)胞懸液。

②由上圖結(jié)果可知，奧曲肽對于__________性前列腺癌的治療效果可能更好。

（3）為進(jìn)一步探明奧曲肽的作用機(jī)制，研究人員在相同條件下，用1000nmol/L的該多肽處理DU145細(xì)胞，分別于24h、48h、72h提取各組細(xì)胞總RNA，再以mRNA為模板__________出cDNA，然后用PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)片段，并對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行凝膠電泳來測定細(xì)胞中VEGF和Caspase-3的轉(zhuǎn)錄水平，結(jié)果如下圖所示。

注：VEGF是促進(jìn)血管生成的基因，可刺激腫瘤細(xì)胞的生成和增殖：Caspase-3是細(xì)胞凋亡過程中最主要的蛋白酶基因

β-actin是檢測基因表達(dá)水平常用的參照基因，表達(dá)量不受細(xì)胞形態(tài)變化或生活條件的影響，轉(zhuǎn)錄水平相對穩(wěn)定，在實(shí)驗(yàn)中可作為校準(zhǔn)和消除由于檢測方法等無關(guān)變量對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。β-actin的表達(dá)產(chǎn)物最可能是____________________（填字母）。

A．血紅蛋白 B．細(xì)胞骨架蛋白 C．胰島素

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，奧曲肽抑制了DU145細(xì)胞中__________基因的轉(zhuǎn)錄水平。據(jù)此研究人員推測，奧曲肽治療前列腺癌的機(jī)制可能是__________（2分）。

Answer 1

【答案】 基因突變（原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變） 貼壁 接觸抑制 胰蛋白 雄性激素非依賴 逆轉(zhuǎn)錄 B VEGF 通過抑制VEGF基因的表達(dá)，減少腫瘤細(xì)胞增殖和腫瘤血管的生成，從而抑制腫瘤生長：促進(jìn)Caspase-3基因的表達(dá)，加速腫瘤凋亡

【解析】試題分析：奧曲肽（1000nmol/L，處理24h）對于雄性激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞DU145抑制率較高，故奧曲肽對于雄性激素非依賴的治療效果更好。奧曲肽處理DU145細(xì)胞時間越長VEGF基因的表達(dá)量越少，Caspase-3基因的表達(dá)越高，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，奧曲肽抑制了DU145細(xì)胞中VEGF基因的表達(dá)，促進(jìn)Caspase-3基因的表達(dá)：。

（1）癌癥發(fā)生的原因是致癌因子引起了基因突變（原癌和抑癌基因發(fā)生突變），可能與飲食習(xí)慣等因素有關(guān)。
（2）①動物在培養(yǎng)過程中，細(xì)胞具有貼壁生長的特點(diǎn)，癌細(xì)胞失去接觸抑制，因此傳代培養(yǎng)時，通常用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞分散。

在培養(yǎng)過程中，動物細(xì)胞具有貼壁生長的特點(diǎn)，當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞增殖到一定程度時，會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，因此傳代培養(yǎng)時，通常用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞分散。
②由圖1結(jié)果可知，奧曲肽（1000nmol/L，處理24h）對于雄性激素非依賴性前列腺癌細(xì)胞DU145抑制率較高，故奧曲肽對于雄性激素非依賴的治療效果更好。
（3）為進(jìn)一步探明奧曲肽的作用機(jī)制，研究人員在相同條件下，用1000nmol/L的該多肽處理DU145細(xì)胞，分別于24h、48h、72h提取各組細(xì)胞總RNA，再以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄出cDNA，然后用PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)片段，p-actin基因檢測基因表達(dá)水平常用的參照基因，表達(dá)量不受細(xì)胞形態(tài)變化或生活條件的影響，轉(zhuǎn)錄水平相對穩(wěn)定，在實(shí)驗(yàn)中可作為校準(zhǔn)和消除由于檢測方法等無關(guān)變量對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。而A血紅蛋白基因和C胰島素基因并非在所有細(xì)胞中都有表達(dá)，表達(dá)量受細(xì)胞形態(tài)變化（細(xì)胞分化）的影響，轉(zhuǎn)錄水平不穩(wěn)定，故p-actin的表達(dá)產(chǎn)物最可能是B細(xì)胞骨架蛋白（該基因在所有細(xì)胞中都表達(dá)）。
由圖2可知：奧曲肽處理DU145細(xì)胞時間越長VEGF基因的表達(dá)量越少，Caspase-3基因的表達(dá)月高，由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，奧曲肽抑制了DU145細(xì)胞中VEGF基因的表達(dá)，減少腫瘤細(xì)胞增殖和腫瘤血管的生成，從而抑制腫瘤生長，促進(jìn)Caspase-3基因的表達(dá)，加速腫瘤凋亡。