Question

【題目】福建山區(qū)發(fā)現(xiàn)一種珍稀植物水晶蘭，全草含藥用價(jià)值很高的水晶蘭甙。某科研所將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細(xì)胞，流程圖如下。回答下列問(wèn)題：

（1）HindⅢ和BamHⅠ等限制酶主要是從 ______中分離純化得到的，都作用于DNA特定部位的_________鍵。使用HindⅢ和BamHⅠ兩種酶切割Ti質(zhì)粒可防止切開(kāi)的質(zhì)粒重新連接起來(lái)，原因是_________。圖中②過(guò)程需要加入_________酶。

（2）基因工程使用的運(yùn)載體除質(zhì)粒外，還常用_________等。若需要大量合成目的基因，可采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，其條件除需模板、原料外，還需__________________等。

（3）圖中生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因玉米的核心步聚是_________________（填標(biāo)號(hào)）。將目的基因?qū)�入玉米�?xì)胞的方法為_________，這種方法的優(yōu)點(diǎn)是能使目的基因隨著Ti質(zhì)粒的_________插入到植物細(xì)胞的_________上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

（4）④過(guò)程是__________________，過(guò)程⑤中可以用__________________技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)篩選。

Answer 1

【答案】 原核生物（或微生物） 磷酸二酯 兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端 DNA連接 動(dòng)植物病毒、λ噬菌體衍生物 熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物 ② 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 T-DNA 染色體DNA 脫分化 抗原-抗體雜交

【解析】試題分析：分析題圖，圖示是將水晶蘭甙基因?qū)�入玉米中制備出能合成水晶蘭甙的玉米愈傷組織細(xì)胞，其中①表示獲取目的基因的過(guò)程，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞甲的過(guò)程，④表示脫分化過(guò)程，⑤表示檢測(cè)玉米愈傷組織細(xì)胞是否合成水晶蘭甙，常用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（1）HindⅢ和BamHⅠ都為限制酶，一般取自于原核生物，是基因工程的剪刀，能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；兩種限制酶切割后產(chǎn)生不同的黏性末端，所以可以防止切開(kāi)的質(zhì)粒重新連接起來(lái)；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，需要用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒連接起來(lái)。

（2）基因工程常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒、λ噬菌體衍生物等。PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因需要的條件有模板、原料、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶等。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心步驟是②構(gòu)建基因表達(dá)載體；圖示將目的基因?qū)�入玉米�?xì)胞（植物細(xì)胞）的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

（4）圖中④是脫分化過(guò)程；⑤檢測(cè)目的基因是否翻譯形成蛋白質(zhì)可用抗原-抗體雜交法。