【題目】Rag2 基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES 細(xì)胞)對 Rag2 基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如圖:

1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的_____。小鼠體細(xì)胞體外培養(yǎng)時, 所需氣體主要是 O2 CO2,其中 CO2 的作用是維持培養(yǎng)液(基)的_____

2)步驟②中,重組胚胎培養(yǎng)到_________期時,可從其內(nèi)細(xì)胞團分離出 ES 細(xì)胞。體外培養(yǎng)條件下,ES 細(xì)胞在_____細(xì)胞上,能夠維持只增殖不分化的狀態(tài)。

3)步驟③中,需要構(gòu)建含有 Rag2 基因的表達載體?梢愿鶕(jù) Rag2 基因的__________設(shè)計引物,利用 PCR 技術(shù)擴增 Rag2 基因片段。PCR 過程需要經(jīng)過多次循環(huán),每一個循環(huán)包括:加熱變性冷卻復(fù)性_____,其中冷卻復(fù)性的目的_________。用 HindⅢ和 PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得 Rag2 基因片段。為將該片段 直接連接到表達載體,所選擇的表達載體上應(yīng)具有_____酶的酶切位點。

4)為檢測 Rag2 基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的_____,用_______________的抗體進行雜交實驗。

【答案】細(xì)胞核 pH值(或酸堿度) 囊胚 飼養(yǎng)層 核苷酸序列 加熱延伸 使引物與互補鏈結(jié)合 HindⅢ和Pst 蛋白質(zhì); Rag2蛋白

【解析】

分析題圖:圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解,其中表示核移植過程,表示早期胚胎培養(yǎng)過程,表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

1)步驟中,在核移植前應(yīng)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。小鼠體細(xì)胞體外培養(yǎng)時,所需氣體主要是O2CO2,其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液(基)的pH值(或酸堿度)。
2)囊胚期才出現(xiàn)內(nèi)細(xì)胞團,內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,屬于胚胎干細(xì)胞;體外培養(yǎng)條件下,ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中,能夠維持只增殖不分化的狀態(tài)。
3)步驟中,需要構(gòu)建含有Rag2基因的表達載體?梢愿鶕(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計引物,利用PCR技術(shù)擴增Rag2基因片段。PCR過程需要經(jīng)過多次循環(huán),每一個循環(huán)包括:加熱變性冷卻復(fù)性加熱延伸,其中冷卻復(fù)性的目的使引物與互補鏈結(jié)合。構(gòu)建基因表達載體時,應(yīng)該用同種限制酶切割外源DNA和運載體,因此用HindⅢPstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體,所選擇的表達載體上應(yīng)具有HindⅢPstⅠ酶的酶切位點。
4)為檢測Rag2基因的表達情況,可采用抗原抗體雜交法,即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)(抗原),用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖是某立體農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中部分能量流動和物質(zhì)循環(huán)示意圖。下列敘述正確的是(

A.該圖體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的三種成分間的相互關(guān)系

B.桑樹可以利用沼渣中有機物的能量進行同化作用

C.蠶沙中的能量屬于該生態(tài)系統(tǒng)中桑樹同化的能量

D.水生植物和桑樹固定的太陽能是流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】為了確定合理放牧強度、實現(xiàn)草原的可持續(xù)利用,科研人員在草原開展了不同放牧強度的實驗。實驗結(jié)果如圖所示,回答下列問題:

1)當(dāng)草原返青時,綠色為食草動物提供了可以采食的信息,這種信息屬于____(填“物理”或“化學(xué)”或“行為”)信息,這一實例體現(xiàn)的信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)的作用是____。

2)由圖1實驗結(jié)果可得到的初步結(jié)論是,____。由圖2結(jié)果可推測要保持草原可持續(xù)性利用應(yīng)采用____放牧強度,理由是 ____

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】現(xiàn)有兩個非常大的某昆蟲種群,個體間隨機交配,沒有遷入和遷出,無突變,自然選擇對Aa基因控制的性狀沒有作用。種群1A基因頻率為80%,a基因頻率為20%;種群2A基因頻率為60%,a基因頻率為40%。假設(shè)這兩個種群大小相等,地理隔離不再存在,兩個種群完全合并為一個可隨機交配的種群,則下一代中Aa的基因型頻率是(

A.75%B.50%C.42%D.21%

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖為某紅綠色盲家族系譜圖,相關(guān)基因用XB、Xb表示。人的MN血型基因位于常染色體上,基因型有3種:LMLM(M型)、LNLN(N型)、LMLN(MN型)。已知I-1、I-3為M型,I-2、I-4為N型。下列敘述正確的是

A. Ⅱ-3的基因型可能為LMLNXBXB

B. Ⅱ-4的血型可能為M型或MN型

C. Ⅱ-2是紅綠色盲基因攜帶者的概率為1/2

D. Ⅲ-1攜帶的Xb可能來自于I-3

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】剛果紅能夠與纖維素形成紅色復(fù)合物,可用其鑒定纖維素分解菌。某研究小組將濾紙埋在土壤中,30天后從濾紙上取6 g土壤樣品加入30 mL生理鹽水中溶解,得到了富有纖維素分解菌的菌原液,并進行如下實驗,回答下列問題:

(1)稀釋菌原液:為確定合適的稀釋倍數(shù),小組成員取1 mL菌原液進行如下圖所示的操作,在統(tǒng)計菌落時,發(fā)現(xiàn)平板上的平均菌落數(shù)為40個,則每毫升菌原液中的細(xì)菌數(shù)大約為________個。

(2)培養(yǎng)基的準(zhǔn)備:在對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌的過程中,完成加水、裝鍋、加熱排氣、保溫保壓適當(dāng)時間后,切斷熱源,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,________,打開排氣閥,旋開固定螺栓,開蓋,才可以取出滅菌的培養(yǎng)基等物品。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時倒平板,在培養(yǎng)基凝固之前加入滅菌的剛果紅,從功能上來看,該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中碳源主要是________。 

(3)接種與觀察:在無菌條件下,用________取0.1 mL稀釋后的菌懸液進行圖1中________所示的操作,室溫放置2~3分鐘后倒置于恒溫箱中培養(yǎng),室溫放置2~3分鐘的目的是__________________。培養(yǎng)過程中定期觀察菌落特征和透明圈的大小,圖2中D/d的值越________,表示該菌對纖維素分解能力越強。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖是生態(tài)系統(tǒng)中碳循環(huán)的模式圖,相關(guān)選項正確的是( )

A.圖中的D表示大氣中的CO2

B.D →A是呼吸作用

C.圖中的E是生態(tài)系統(tǒng)的基石

D.該循環(huán)具有全球性

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖中①②③代表通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育新植株的三條途徑,請回答下列問題:

1)外植體a、b、c來自同一植株的不同部位,它們的全能性表達程度_________(填“一般相同”或“一般不同”)。

2)將含B1的試管放在搖床上,在一定的條件下,通過___________培養(yǎng)可以分散成單細(xì)胞。這種單細(xì)胞往往細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大,這是_________細(xì)胞的特征,這種細(xì)胞發(fā)育成的B3稱為______________。

3)不同來源的C1可通過__________將它們的遺傳物質(zhì)重新組合,再通過對重組細(xì)胞進行培養(yǎng),獲得具有特定性狀的新植株。

4)通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系,可以實現(xiàn)能產(chǎn)生重要____________(如某些中藥)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。

5)植物細(xì)胞在培養(yǎng)過程中往往會發(fā)生__________,在培養(yǎng)基中加入____________可誘發(fā)和篩選抗鹽突變體。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖表示某植物葉肉細(xì)胞中部分物質(zhì)轉(zhuǎn)化途徑,其中①④代表有關(guān)生理過程。下列敘述錯誤的是(

A.參與①的色素有葉綠素和類胡蘿卜素

B.①、②均在生物膜上進行

C.①、②、④均有ATP生成

D.④產(chǎn)生的[H]全部來自C6H12O6

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