Question

【題目】重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)是臨床血栓疾病治療的主要生物藥品。家兔具有多胎、妊娠期短、繁殖快、全年多發(fā)情，產(chǎn)仔率高等優(yōu)點(diǎn)，可以作為乳腺生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)藥物。下圖是利用轉(zhuǎn)基因兔生產(chǎn)重組人纖溶酶原激活劑(rhPA)的過程，請(qǐng)據(jù)圖回答。

(1)構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶______切割質(zhì)粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用__________________酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。

(2)對(duì)母兔注射__________使其超數(shù)排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)入家兔受精卵中最有效的導(dǎo)入技術(shù)是_____________。

(3)將受精卵置于37 ℃的95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經(jīng)_______________處理。

(4)子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器，原因有____________________________________、________________________________________。

Answer 1

【答案】XhoⅠ Sal Ⅰ和NotⅠ 促性腺激素 顯微注射技術(shù) 同期發(fā)情(發(fā)情/孕激素) 只有部分子代兔導(dǎo)入了人纖溶酶原激活劑基因 公兔不能表達(dá)人纖溶酶原激活劑基因

【解析】

動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺(tái)，使外源基因?qū)�入�?dòng)物基因組中并定位表達(dá)于動(dòng)物乳腺，利用動(dòng)物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在動(dòng)物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價(jià)值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的總稱。
乳腺生物反應(yīng)器是最理想的生物反應(yīng)器，它的優(yōu)點(diǎn)：（1）藥物蛋白只在乳腺內(nèi)，對(duì)動(dòng)物的生理活動(dòng)不影響。（2）長期收集也不會(huì)對(duì)動(dòng)物造成傷害。（3）產(chǎn)品成本低。（4）無論純化還是使用都很方便。

（1）據(jù)圖分析可知，構(gòu)建rhPA基因表達(dá)載體需要用限制酶XhoⅠ切割質(zhì)粒和目的基因，為獲得乳腺特異性表達(dá)載體需用SalⅠ和NotⅠ酶切割重組質(zhì)粒使之線性化。

（2）對(duì)母兔注射促性腺激素使其超速排卵，并與正常公兔配種。將乳腺特異性表達(dá)載體導(dǎo)人家兔受精卵中最有效的導(dǎo)人技術(shù)是顯微注射技術(shù)。

（3）將受精卵置于37℃的95%空氣和5%CO2氣體環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后移植到代孕兔的輸卵管中，代孕兔需經(jīng)同期發(fā)情（孕激素）處理。

（4）只有部分子代兔導(dǎo)入了人組織纖溶酶原激活劑基因、公兔不能表達(dá)人組織纖溶酶原激活劑，故子代兔需要經(jīng)過篩選過程才能獲得生產(chǎn)人組織纖溶酶原激活劑的生物反應(yīng)器。