Question

4．在生物柴油生產(chǎn)的過程中，會用到脂肪酶和油脂兩種原料．已知細(xì)菌A可以產(chǎn)生油脂，細(xì)菌B可以產(chǎn)生脂肪酶，請回答有關(guān)問題：
（1）菌體A中的油脂會被蘇丹III染成橘黃色．若菌體A產(chǎn)生的油脂易揮發(fā)，可選用水蒸氣蒸餾法（填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取．
（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的菌體B單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以油脂為碳源的固體（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)．
（3）若發(fā)現(xiàn)菌體B中含有雜菌，則需要對其接種純化，常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（4）為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行保藏．對于頻繁使用的菌種，采用臨時保藏的方法；對于需要長期保存的菌種，采用甘油管藏的方法．

Answer 1

分析 1、植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等．
（1）蒸餾法：芳香油具有揮發(fā)性．根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置的標(biāo)準(zhǔn)，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾．
（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點的有機(jī)溶劑中，是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點的溶劑，剩下的就是芳香油．
（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機(jī)械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法．
2、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）脂肪可被蘇丹Ⅲ（蘇丹Ⅳ）染成橘黃色（紅色）故顯微觀察時，A菌體中的油脂通�？捎锰K丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染色．若菌體A產(chǎn)生的油脂易揮發(fā)，可選用水蒸氣蒸餾法從菌體中提�。�
（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的菌體B單菌落，需要使用選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．
（3）微生物的分離和純化常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法．
（4）為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行保藏．對于頻繁使用的菌種，采用臨時保藏的方法；對于需要長期保存的菌種，采用甘油管藏的方法．
故答案為：
（1）橘黃      水蒸氣蒸餾法
（2）固體
（3）稀釋涂布平板法    平板劃線法
（4）臨時保藏     甘油管藏

點評 本題考查了植物有效成分的提取以及微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠掌握脂肪鑒定的原理，識記植不同物芳香油的提取方法，掌握微生物分離與純化的方法．