Question

18．據(jù)報(bào)道某實(shí)驗(yàn)室在海泥中分離純化得到多株海洋嗜鹽細(xì)菌，經(jīng)篩選發(fā)現(xiàn)其中某種嗜鹽菌能產(chǎn)生胡蘿卜素．某微生物興趣小組進(jìn)行了如下的探究和分析，請據(jù)此回答以下問題：
（1）該小組用接種海泥的某種固體培養(yǎng)基獲得海洋嗜鹽細(xì)菌，所用的培養(yǎng)基從功能上看，屬于選擇培養(yǎng)基．該培養(yǎng)基的成分中無機(jī)鹽的含量應(yīng)該比通用培養(yǎng)基高．
（2）在海泥中獲得產(chǎn)生胡蘿卜素的嗜鹽菌后，可用平板劃線法或稀釋涂布平板法方法進(jìn)行分離和純化．純化得到的菌株需要長期保存，可采用甘油管藏方法．
（3）為了探究該菌的最適生長條件，小組決定分組培養(yǎng)并用間接計(jì)數(shù)法對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)．間接計(jì)數(shù)法菌液的接種量是0.2ml．最終選取菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，大于300個菌落的平板不參與計(jì)數(shù)的原因是多于300，菌落重疊的概率大，將產(chǎn)生較大誤差．
（4）提取和鑒定上述分離純化所得的細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的物質(zhì)應(yīng)選用萃�。ㄕ麴s、萃�。┓�，原因是胡蘿卜素不易揮發(fā)，易溶于有機(jī)容劑（答兩點(diǎn)即可）．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
3、植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等．
（1）蒸餾法：芳香油具有揮發(fā)性．把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法．
根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置的標(biāo)準(zhǔn)，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾．
（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點(diǎn)的溶劑，剩下的就是芳香油．
（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機(jī)械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基的作用是篩選獲得海洋嗜鹽細(xì)菌，屬于選擇培養(yǎng)基；因?yàn)橐�篩選的是嗜鹽細(xì)菌，所以培養(yǎng)基的成分中無機(jī)鹽的含量應(yīng)該比通用培養(yǎng)基高．
（2）分離和純化微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法．長期保存菌種，可采用甘油管藏法．
（3）間接計(jì)數(shù)法菌液的接種量是0.2ml．計(jì)數(shù)時，若菌落數(shù)目多于300，則菌落重疊的概率大，將產(chǎn)生較大誤差，因此最終選取菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，大于300個菌落的平板不參與計(jì)數(shù)．
（4）嗜鹽菌能產(chǎn)生胡蘿卜素，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，易溶于有機(jī)容劑，因此提取胡蘿卜素應(yīng)選用萃取法．
故答案為：
（1）選擇     無機(jī)鹽
（2）平板劃線法或稀釋涂布平板法       甘油管藏
（3）0.2      多于300，菌落重疊的概率大，將產(chǎn)生較大誤差
（4）萃取      胡蘿卜素不易揮發(fā)，易溶于有機(jī)容劑

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、從生物材料中提取某些特定成分，要求考生識記兩種常用的幾種方法及保存菌種的兩種方法；識記從生物材料中提取某些有效成分的方法及原理，能結(jié)合所學(xué)的致死準(zhǔn)確答題．