Question

5．科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)，操作過程如圖所示．已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是一↓GATC一．請根據(jù)材料回答下列問題：

（1）過程①獲取目的基因的方法是反轉(zhuǎn)錄法．根據(jù)圖示分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，應(yīng)用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒，用限制酶Ⅱ切割目的基因．
（2）將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，若能夠生長的，則說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒，反之則沒有導(dǎo)入．
（3）若是培育轉(zhuǎn)基因植物，則常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞中．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示表示利用基因工程培育抗蟲棉過程，其中①表示通過人工合成法獲取目的基因；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答 解：（1）圖中①表示采用反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）獲取目的基因；由于限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，所以在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，要用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒，用限制酶Ⅱ切割目的基因．
（2）用限制酶Ⅰ切割質(zhì)粒后會破四環(huán)素抗性基因，不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存的大腸桿菌已經(jīng)成功導(dǎo)入普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入．
（3）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其中農(nóng)桿菌的作用是感染植物，將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）ⅠⅡ
（2）氨芐青霉素   普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因棉花培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的工程及操作步驟，能根據(jù)限制酶識別序列選擇合適的限制酶，并能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．