【題目】富集培養(yǎng)是微生物學中強有力的技術(shù)手段之一,主要是指利用不同微生物間生命活動特點的不同,制定環(huán)境條件,使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長,從而使其在群落中的數(shù)量大大增加,人們能夠更容易地從自然界中分離得到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離的微生物的特點,從物理、化學、生物及綜合多個方面進行選擇,如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等許多方面。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。

(1)本實驗所需培養(yǎng)基為_______________,碳源為________________________。

(2)實驗原理是_____________________________________________________。

(3)①→③重復培養(yǎng)的目的是__________________________________________。

(4)⑤菌落中大部分是降解_________________的微生物。

(5)⑥為__________組,⑦為_______組,設(shè)置⑥的目的是___________________。

(6)⑤→⑥采用___________法接種到⑥的培養(yǎng)基中,在操作過程中為防止污染應(yīng)注意的事項是_______。

【答案】 選擇培養(yǎng)基 對羥基苯甲酸 利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,經(jīng)富集培養(yǎng),分離出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物 增大對羥基苯甲酸微生物的比例 對羥基苯甲酸 對照 實驗 說明通過富集培養(yǎng)的確得到了能降解對羥基苯甲酸的微生物 單細胞挑取 接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌,燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻,同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中,并塞好棉塞,接種環(huán)在火焰上灼燒,殺滅殘留物

【解析】(1)如果要設(shè)計實驗探究該實驗分離出的細菌是否只能利用對羥基苯甲酸作碳源,那么實驗所用培養(yǎng)基應(yīng)是對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。

(2)本實驗原理是利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,經(jīng)富集培養(yǎng),分離出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物。

(3)經(jīng)過①②③的重復培養(yǎng),增大了分解對羥基苯甲酸的微生物的比例。

(4)由于本實驗培養(yǎng)的微生物主要是能降解對羥基苯甲酸的微生物,所以⑤菌落中大部分是降解對羥基苯甲酸的微生物。

(5)⑥中沒有對羥基苯甲酸,⑦中含有對羥基苯甲酸,所以⑥是對照組,⑦是實驗組。對照的目的是說明通過富集培養(yǎng)的確得到了能降解對羥基苯甲酸的微生物。最后通過設(shè)立對照及單菌落挑取法將培養(yǎng)基上的單菌落分別接種到含有對羥基苯甲酸及不含有該物質(zhì)的培養(yǎng)基上,驗證是否得到了目的菌株。

(6)⑤→⑥采用單細胞挑取法接種到⑥⑦的培養(yǎng)基中,整個操作過程都應(yīng)是無菌操作,接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌,燒紅的接種環(huán)在空氣中冷卻,同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中,并塞好棉塞,接種環(huán)用完之后也要在火焰上灼燒以殺滅殘留微生物。

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