Question

【題目】某同學為探究變質(zhì)牛奶中細菌的種類，取ImL的樣液，加入盛有9mL無菌水的試管中稀釋，然后采用平板劃線法對牛奶中的細菌進行分離和鑒別。請回答：

(l)將配置好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌后，冷卻到50℃左右時倒平板，平板冷凝后要倒置存放，原因是_______________________、_______________。

(2)平板劃線時，在做第二次以及其后的劃線操作，總是從上一次劃線的末端開始，以便得到_____________________。

(3)劃線操作結(jié)束時，仍然需要對接種環(huán)灼燒的理由是_______________________。接種完成后，平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時是否需要倒置？__________（答“需要”或“不需要”）。

(4)如果要檢測牛奶中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入_____________（填物質(zhì)），觀察是否出現(xiàn)_____________（填顏色）的菌落。

Answer 1

【答案】防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)皿 避免培養(yǎng)基中水分過快揮發(fā) 得到由單個細菌繁殖而成的菌落 及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者 需要 伊紅美藍 黑色（或藍黑色）

【解析】

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等。稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)。大腸桿菌的鑒定需要使用伊紅美藍指示劑。據(jù)此分析作答。

（1）平板冷凝后要倒置存放，原因是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)皿，同時避免培養(yǎng)基中水分過快揮發(fā)。

（2）平板劃線法操作時，劃線時，在做第二次以及其后的劃線操作，總是從上一次劃線的末端開始，目的是使下一次劃線時的菌種只能來自于上一次劃線的末端，以便得到由單個細菌繁殖而成的菌落。

（3）劃線操作結(jié)束時，為及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者，需要對接種環(huán)灼燒滅菌。接種完成后，平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)需要倒置。

（4）大腸桿菌的鑒定需要使用伊紅美藍指示劑，如果菌落呈 黑色（或藍黑色）則為大腸桿菌菌落。