Question

【題目】如今人類已跨入了蛋白質(zhì)時(shí)代，對(duì)蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用，首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：______、_____、______和純度鑒定。

(2)如果要從紅細(xì)胞中分離出血紅蛋白，實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，這樣做的目的是_______。

(3)裝填凝膠色譜柱時(shí)，要注意色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡必須重新裝。這是因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中________，降低分離效果。

(4)如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實(shí)驗(yàn)裝置，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

①甲裝置用于_________，目的是________。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫___________，是根據(jù)_______________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。

②用乙裝置分離血紅蛋白時(shí)，待______________________接近色譜柱的底端時(shí)，用試管收集流出液，每5 mL收集一管，連續(xù)收集。

Answer 1

【答案】樣品處理 粗分離 純化 防止血液凝固 蛋白質(zhì)的洗脫次序 透析(粗分離) 去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 凝膠色譜法 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱的底端

【解析】

（1）蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

步驟	操作
樣品處理	通過(guò)紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液
粗分離	通過(guò)透析法去除血紅蛋白溶液中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)
純化	通過(guò)凝膠色譜法分離相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)
純度鑒定	經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對(duì)純化后的蛋白質(zhì)進(jìn)行純度鑒定

（2）甲是透析裝置，乙是利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的裝置。

(1) 蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

(2) 檸檬酸鈉是一種抗凝劑，在新鮮血液中加入檸檬酸鈉，可以防止血液凝固。

(3) 裝填凝膠色譜柱時(shí)，若產(chǎn)生氣泡，則氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，從而降低分離效果。

(4) ①甲是透析裝置，用于透析，其目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，使大分子蛋白質(zhì)保留在袋中。乙是利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的裝置，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。

②由于血紅蛋白帶有紅色，當(dāng)紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱的底端時(shí)，用試管收集血紅蛋白，每5 mL收集一管，連續(xù)收集。