Question

16．有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境．研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解．分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示．

（1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、氮源與無(wú)機(jī)鹽四類(lèi)，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖．
（2）為了獲得純凈的培養(yǎng)物，無(wú)菌技術(shù)非常關(guān)鍵．無(wú)菌技術(shù)除了防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他微生物污染外，還可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)．劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落．造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始（至少答2點(diǎn)）．
（4）為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液作圖乙所示實(shí)驗(yàn)．該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？不合理，缺少空白對(duì)照．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是探索苯磺隆降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，圖甲中，首先用選擇培養(yǎng)基從土壤中篩選出菌種，再采用平板劃線法純化出相應(yīng)的菌種；圖乙中：通過(guò)測(cè)定苯磺隆的濃度測(cè)定其降解率．據(jù)此答題．

解答 解：（1）微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)．該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，因?yàn)橹挥心芾�用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖．
（2）無(wú)菌技術(shù)除了防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他微生物污染外，還可以避免操作者自身被微生物污染．
（3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)．劃線接種時(shí)，在第一區(qū)域劃線后須將該工具灼燒滅菌后再劃線，在第二次劃線時(shí)須從第一次劃線的末端開(kāi)始，這樣做的目的是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基上．
（4）從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實(shí)驗(yàn)假設(shè)是目的菌株通過(guò)分泌某種蛋白質(zhì)來(lái)降解苯磺隆，但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的對(duì)照組實(shí)驗(yàn)，否則沒(méi)有說(shuō)服力，因而不合理．
故答案為：
（1）無(wú)機(jī)鹽     只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖
（2）避免操作者自身被微生物污染
（3）接種環(huán)    ①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)          不合理，缺少空白對(duì)照

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合探究實(shí)驗(yàn)過(guò)程，考查微生物的培養(yǎng)和分離、探究實(shí)驗(yàn)等知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、種類(lèi)及作用；掌握分離微生物常用的兩種方法及操作過(guò)程；掌握探究實(shí)驗(yàn)的原則，能結(jié)合圖中信息知識(shí)答題．